近期，农业农村部发布了五项与奶业相关的标准，其中包括NY/T4630—2025《牛乳及其制品中α-乳白蛋白和β-乳球蛋白的测定 高效液相色谱法》。该标准将于2025年5月1日正式实施。随着人民生活水平的提升，奶制品在中国的消费量迅速增长。然而，婴幼儿中牛乳蛋白过敏症（Cow's Milk Allergy, CMA）的发生相对普遍，并且呈逐年上升趋势。婴幼儿主要对β-乳球蛋白和α-乳白蛋白过敏，因此建立一种高特异性、高灵敏度、快速准确的检测方法，对于保障CMA患儿的健康具有积极意义。

在此背景下，我们参考上述标准，基于高性能尺寸排阻色谱柱TSKgel UP-SW3000（46mm ID×30cm, 2μm）设计了一种牛乳及其制品中β-乳球蛋白和α-乳白蛋白的检测方法。样品预处理方面，对高温杀菌牛乳和灭菌牛乳进行了平行实验。实验中称取125g样本（精确至0.1mg），加入10mL水混匀后，使用盐酸溶液调节pH至4.60±0.05，再将样品转移至25mL容量瓶中，加水定容后混匀。接着，将样品转移至离心管中，静置2小时，以12000r/min离心10分钟。然后准确移取1mL上清液至5mL容量瓶中，加入3mL盐酸胍缓冲溶液，再加入50µLβ-巯基乙醇，使用盐酸胍缓冲溶液定容混匀，于室温静置2小时，摇匀后过滤，得到待测样品溶液。

在实验条件方面，使用了TSKgel UP-SW3000色谱柱，流动相为盐酸胍缓冲溶液，其流速为0.18mL/min，检测波长设置为UV@280nm，进样量为10µL。通过实验，我们得到了β-乳球蛋白和α-乳白蛋白的检测结果，发现这两种成分的峰分离度大于15。在绘制标准曲线时，以β-乳球蛋白和α-乳白蛋白的浓度为横坐标，色谱峰面积为纵坐标，相关系数均大于0.99。这一方法具有省时和高检测灵敏度的优点，是生物医疗领域中一种有力的检测工具。

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